切向流過濾（TFF）是生物制品下游工藝中必不可少的步驟，可有效用于產(chǎn)品的澄清和提純。膜過濾作為一種固液分離技術(shù)，在生物技術(shù)行業(yè)有著悠久的使用歷史。根據(jù)膜孔的特點，該技術(shù)可分為微濾和超濾。膜孔選擇的經(jīng)驗法則是，所選膜的截留分子量需要是要保留的蛋白質(zhì)的 1/3-1/5。 TFF 常用于蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽、液體交換和分餾。近年來，TFF 還被用于細胞收集和細胞裂解物的澄清。
傳統(tǒng)上，離心通常用于細胞裂解物澄清和細胞收獲，因為它在小規(guī)模加工中更容易處理，加工時間也更快。但是，當規(guī)模擴大時，情況就大不相同了，因為實驗室規(guī)?；蚺_式離心機和大型工業(yè)離心機是兩個不同的概念。同樣，如果離心過程要按比例縮小以進行驗證或過程優(yōu)化，也會出現(xiàn)同樣的問題。通過保持流道規(guī)格不變，TFF 可以很容易地按比例放大或縮小。這對生物制藥尤為重要，因為其中，工藝開發(fā)和技術(shù)改造更為復雜和精細。
此外，支持將TFF用于細胞裂解液澄清等應用的另一個原因是新一代膜功能更強大，可以獲得高通量和高效率的過程。在生物過程流程開始時使用 TFF 的優(yōu)勢在于它可以在下游過程的初始步驟中實現(xiàn)澄清和濃縮。通過濃縮目標蛋白，TFF 可以減少下游操作的泵尺寸、緩沖液體積和儲罐體積。如果后續(xù)操作單元是色譜，則在上柱前使用 TFF 可以減少處理時間、柱尺寸和填充體積，還可以提高柱壽命和性能。
另一個常見問題是，與離心相比，使用 TFF 進行細胞裂解液澄清需要使用更多的緩沖液，但這取決于膜對目標產(chǎn)物和雜質(zhì)的保留系數(shù)。保留系統(tǒng)可以通過分析注射液、回流液和濾液來計算。解決高緩沖液用量的一種方法是在需要保留雜質(zhì)時使用目標蛋白保留率較低而雜質(zhì)保留率較高的膜。另一種方法是使用串聯(lián) TFF 單元操作。串聯(lián)操作可以減少緩沖液的需求，因為如果后一個單元的目的是保留蛋白質(zhì)，這一步的濾液可以作為前一個TFF單元的進樣。
